新冠病毒研究用水:二氧化碳培養箱用水要求
新冠病毒的研究會(hui) 用到實驗室常見的儀(yi) 器——二氧化碳培養(yang) 箱,通過模擬類似細胞/組織在生物體(ti) 內(nei) 的生長環境,來對細胞/組織進行體(ti) 外培養(yang) ,廣泛應用於(yu) 醫學、免疫學、遺傳(chuan) 學、微生物、農(nong) 業(ye) 科學、藥物學的研究和生產(chan) 。

根據工作原理二氧化碳培養(yang) 箱可分為(wei) 水套式和氣套式兩(liang) 種。水套式二氧化碳培養(yang) 箱需要加水,通過水的熱量傳(chuan) 遞保持溫度的恒定和維持足夠的濕度水平。一般培養(yang) 箱會(hui) 在加熱的控製麵板上安裝一個(ge) 蓄水池,需要定期加入超,維持箱內(nei) 的濕度,避免培養(yang) 液蒸發。
培養(yang) 箱為(wei) 什麽(me) 需要加呢?
1、降低水中離子的影響
在細胞培養(yang) 中,一些重金屬離子的含量要求控製在細胞所需的生理範圍內(nei) ,如:銅離子濃度過低,會(hui) 影響相關(guan) 酶的活性及相應的生理代謝途徑,進而影響細胞的正常生長;銅離子濃度過高時,促進自由基形成,同時能氧化蛋白、脂類和 DNA,造成細胞膜電位的下降進而引起細胞的死亡;鈣、鎂等金屬離子會(hui) 降低胰酶活力,達不到消化的效果。
通常,電阻率儀(yi) 能檢測到的18.2 MΩ·cm的超純水中離子雜質的總含量小於(yu) 1ppb(250C),已有效去除了水中的金屬離子。
牛血清和培養(yang) 基中的離子濃度已滿足細胞生長的需要,在細胞培養(yang) 試劑的配製和細胞培養(yang) 箱用水,為(wei) 避免幹擾,應該選用超純水,尤其是在配置消化液時需要使用低鈣鎂型的超純水。使用超純水,不僅(jin) 可有效防止礦物質儲(chu) 積在水箱內(nei) 產(chan) 生腐蝕作用,也會(hui) 降低水中的金屬元素對細胞生長的影響。
2、避免微生物的引入
細胞培養(yang) 箱汙染是導致細胞培養(yang) 失敗的一個(ge) 主要因素,會(hui) 殃及整個(ge) 實驗室的細胞培養(yang) 實驗。二氧化碳培養(yang) 箱中的主要汙染源:細菌、真菌(黴菌和酵母菌)、病毒、支原體(ti) 、非同種細胞等。另外,內(nei) 毒素汙染也會(hui) 給細胞培養(yang) 實驗帶來諸多難以預料的不良後果,如,改變細胞形態,影響細胞附著力,活化細胞產(chan) 生細胞因子等,極大程度影響後續實驗進程和結果的準確性。
通常細胞培養(yang) 的內(nei) 毒素汙染來自於(yu) 血清、培養(yang) 液及外加藥物配製用水等。為(wei) 避免細胞培養(yang) 受到內(nei) 毒素汙染的影響,選擇無內(nei) 毒素的超純水進行細胞培養(yang) 相關(guan) 試劑的配製和細胞培養(yang) 箱供水是很關(guan) 鍵的一步。
可有效去除水中的熱原(內(nei) 毒素)、核酸酶、細菌等雜質,是防止外源微生物汙染箱內(nei) 環境的一個(ge) 有效屏障。
3、減少有機物的影響
水中的有機雜質通常是生物源、植物材料腐爛產(chan) 生的腐殖酸,這些溶解在水中的有機物會(hui) 促進微生物的繁殖,阻礙細胞的生長。細胞培養(yang) 的有機物含量要求TOC<5ppb。
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